小说涯

第六章 综合技能训练02（第5页）

（2）显微镜直接检查法。将刮下的皮屑放于载玻片上，滴加煤油，复以载玻片并搓压使病料散开，分开载玻片，置于显微镜下检查。由于皮屑在煤油中被溶解或透明，故虫体易被发现，但虫体已死亡。如欲观察活体，可用液状石蜡或5%的甘油水溶液，虫体在此溶液中短期内不会死亡。

（3）虫体浓集法。为了在较多的病料中查到其中较少的虫体而提高检出率。方法是将病料置于试管中，加入10%KOH溶液，浸泡过夜（如急需检查，可在酒精灯上煮数分钟）使皮屑溶解，虫体自皮屑中分离出来，而后待其自然沉淀（或离心沉淀，以2000转分，5min）则虫体沉淀于管底，吸取沉渣镜检。

（4）温水检查法。将病料浸入40～45℃的温水中，置恒温箱中1～2h后，将浸过的病料倾入表面玻璃内，在解剖镜下检查，活的螨在温热作用下由皮屑内爬出，集成团沉于水底。

（5）培养皿内加温法。将干的病料放于培养皿内，加盖，将其平放于盛有40～45℃温水的杯上，经10～15min后，将皿翻转，则虫体与小量皮屑黏附于皿底，大量皮屑和虫体则倒入皿盖上，取皿底检查。皿盖继续放在温水杯上，15min后可反复进行以上操作。本法可在镜下收集到与皮屑分开的虫体，可供制作玻片标本用。如欲判断收集到的虫体是否存活（尤其是在药物治疗后判断疗效），可采用以上的1、4、5各法（或2法中不加煤油而用液状石蜡或50%甘油生理盐水）能见到虫体的活动。

四、作业掌握螨病的检查技术。

实训九寄生虫的粪便检查法

一、目的要求学会利用畜禽粪便检查技术诊断畜禽蠕虫病。

二、材料与器械凸刃小刀、氢氧化钾、甘油或液状石蜡、试管、离心机、培养皿、生物显微镜等。

三、实验内容采用直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查粪便中卵；并用斯陶尔氏法或麦克马斯特氏法对粪便中虫卵进行计数。

四、方法步骤粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。要取得准确的结果，粪便必须新鲜，送检时间一般不宜超过24h。如检查肠内原虫滋养体，最好立即检查。盛粪便的容器要干净，并防止污染与干燥；粪便不可混杂尿液等，以免影响检查结果。

（一）虫卵检查法

1。直接涂片法滴一滴甘油水溶液于载片上，其上放少许粪便，然后用玻璃棒搅拌，除去粗大的粪渣，涂片的薄厚以在涂片的下面隐约能见到纸上的字迹为宜，盖上盖玻片，显微镜下检查。此方法很简单，可发现各种蠕虫卵和幼虫，但是效果很差。因此只能作为一种辅助方法。

2。漂浮法本方法需要用饱和盐水（把食盐加入沸水锅内直到不溶解为止，大约100ml水中加40g食盐，溶液用纱布过滤待凉后备用）方法如下：

取1～2g粪便放于盛10～20ml饱和盐水的杯内，用玻璃棒或镊子搅拌，使之混匀，然后杯内粪液经纱布或铜筛过滤到另一杯内，静置30～45min。这样比饱和盐水比重轻的那些虫卵就浮到液面上来，再用直径8mm的铁丝圈平着接触**表面，就会有一层含有虫卵的薄膜存于铁丝圈中，将此膜抖落在载玻片上，盖上盖玻片进行镜检。或将粪液滤到一小口玻璃瓶（或指形管）内，使液面较瓶口（或管）略高，在瓶口上盖上盖玻片，静置30min后，将盖片平着提起放于载玻片上镜检。

为了提高本方法的效果，可用硫代硫酸钠饱和液（1750g硫代硫酸钠溶于1000ml的水中）、硫酸镁饱和液（920g硫酸镁溶于1000ml水中）等。操作方法不变，仅仅是改变所用的盐类溶液。这些饱和溶液需要保存在不低于13℃，否则溶液的比重会降低。费勒鹏氏法应用很广，可用本方法诊断各种动物的球虫病，圆形线虫病，某些绦虫病（圆叶目的绦虫）等。

3。沉淀法可用诊断吸虫病及其他蠕虫病。此法常见有两种：

（1）自然沉淀法取5～10g新鲜粪便加20倍清水在一容器内，用玻璃棒搅均匀然后用纱布或用40～60目铜筛过滤到另一容器内，将滤液静置15～20min，弃去上清液，吸取沉淀物放在载玻片上做涂片，加上盖玻片在镜下检查。

（2）离心沉淀法取粪便5～10g，加20倍清水，用玻璃棒搅拌均匀后过滤到离心管内，用离心机摇转2min，然后将离心管内的上层**倒去，再加清水搅匀再离心，如此反复多次直至上层**透明为止，倒去上清液，取沉淀镜检。

用电动离心机时，应掌握在800～1000rmin的速度。转速太慢，虫卵沉淀慢；转速太快，则粪液中大量不必要东西也沉淀下来，影响检查。

（二）虫卵计数法

虫卵计数法，是根据测定畜禽排出的粪便中每克内虫卵数（e。p。g）而推测畜禽体内某种寄生虫的寄生数量，有时尚用于检查某种驱虫药的驱虫效果。

虫卵计数的结果，其数量的多少，受很多因素的影响。因此，只能对感染强度（寄生虫的寄生数量）做一个大致的判断。影响虫卵计数精确性的因素很多，首先是虫卵在粪便中的分布并不绝对均匀，以致我们测得一部分粪样中的虫卵数量，用以推算其排卵总量就会有误差。此外，寄生虫的年龄、宿主的免疫状态、粪便的干湿度、雌虫的数量、驱虫药的服用等很多因素，均影响着虫卵的排出数量和体内虫体数量的比例关系，但虫卵计数仍然常被采用为某一种寄生虫感染强度的指标。

虫卵计数，常以每克粪便中虫卵数来表示（简称e。p。g）

1。斯陶尔氏法在一小玻璃容器上（小三角瓶或大试管）在容量56ml与60ml处各做一个标记。先取0。1N苛性钠的溶液注入容器内加到56ml处，然后再加入被检粪便使**升到60ml刻度处；再加入一些玻璃珠摇**，使粪便完全破碎混匀。然后立即用1ml吸管吸取粪液0。15ml，滴于1～3张载片上，覆以盖片，在显微镜下顺序检查，计算出虫卵总数（注意不可遗漏和重复）因0。15ml粪液中实际含粪量为0。15×（460）=0。01g，因此要得到1g粪便中虫卵数，必须把所得虫卵数乘以100即为全日的排卵数。本法适用于大部分蠕虫卵的计数。

2。麦克马斯特氏法本法是将虫卵浮集于一个计数室内，计数室是由两片载玻片制成。制作时为了使用方便，常将其一片切去一条，使之较另一片窄一些。而后选取厚度为1。5mm的玻片切成小条垫于两片之间，以环氧树脂黏合。

操作方法如下：

取粪便2g，放入小三角瓶或其他玻璃容器内，加饱和溶液58ml。加入小玻璃球15～20枚充分震**，使成均匀乳液，用吸管吸取乳液注入马克马斯特氏虫卵计数室两玻片间，放于显微镜下，计算其在平方厘米方格内的虫卵的总数。由于每一方格的虫卵总数相当于0。15ml中的虫卵数。故此，乘以400即相当于全部60ml乳液中的虫卵总数。而此乳液为2g配成，故此方格中虫卵数乘以200即为每克粪便含虫卵数。

本法只适用于被饱和溶液浮起的各种虫卵，特别适用于圆形线虫卵的计数。

虫卵计数的结果，常可作为诊断寄生虫病的参考。当马线虫卵数目达到500e。p。g时为轻感染；800～1000e。p。g为中感染；1500～2000e。p。g为重感染。在羔羊还应考虑感染线虫的种类，但一般在2000～6000e。p。g应认为是重感染，而在1000e。p。g以上时应给以驱虫。牛每克粪便中含有300～600个虫卵时，应给以驱虫。在肝片吸虫，当牛达到100200e。p。g时，羊达到300～600e。p。g时应考虑其致病性。

五、作业掌握寄生虫虫卵的粪便检查法。

实训十驱虫的方法与技术

一、目的要求学会利用畜禽寄生虫病的驱虫方法与技术。

二、实验方法步骤

（一）选准驱虫时机

对于定期驱虫而言，驱虫效果的好坏与驱虫时机选择的合适与否密切相关。驱虫的具体日期，应根据各种蠕虫的发育史，尤其是在宿主体内发育至成熟的时间，感染的季节动态等来决定，如条件允许选择在“成熟前驱虫”最好。因为这样可以在产卵之前驱除虫体而彻底消灭病原。一般对仔猪蛔虫可于2。5～3月龄和5月龄各进行一次驱虫，对犊牛、羔羊的绦虫，应于当年开始放牧后的1个月内即进行驱虫。

（二）确定驱虫对象

1。根据寄生虫病流行病学资料，同时结合临床症状，抽检一定数量的病畜，以了解群体中寄生虫病感染率及感染强度，然后做出决定。

2。根据动物体质的强弱，有无其他严重疾病以及怀孕与否等情况来确定。一般对于有严重疾病或正处在高热期的患畜，先进行适当的处理，待好转以后再进行驱虫。孕畜在怀孕期间不能驱虫的，应加强管理，于适当时期补行驱虫。对多宿主寄生虫而言，所有带虫动物均应同时驱虫，如肝片吸虫寄生于牛羊，在给牛驱虫的同时，应将附近的羊进行驱虫。