(5)心脏。检查心脏时,注意检查心腔内血液的含量及性状。检查心内膜的色泽、光滑皮、有无出血,各个瓣膜、腱索是否肥厚,有无血栓形成和组织增生或缺损等病变。对心肌的检查,应注意心肌各部的厚度、色泽、质地,有无出血、瘢痕、变性和坏死等。
(6)脾脏。观察其形态和色彩,包膜的紧张度,有无肥厚、梗死、脓肿及瘢痕形成,用手触摸脾的质地(坚硬、柔软、脆弱),然后作一两个纵切,检查脾髓、滤泡和脾小梁的状态,有无结节、坏死、梗死和脓肿等。
(7)肝脏。先检查肝门部的动脉、静脉、胆管和淋巴结。然后检查肝脏的形态、大小、色泽、包膜性状、有无出血、结节、坏死等。最后切开肝组织,观察切面的色泽、质地和含血量等情况。注意切面是否隆突,肝小叶结构是否清晰,有无脓肿、寄生虫性结节和坏死等。
(8)肾脏。先检查肾脏的形态、大小、色泽和质地。注意包膜的状态,是否光滑透明和容易剥离。包膜剥离后,检查肾表面的色泽,有无出血、瘢痕、梗死等病变。然后由肾的外侧向肾门部将肾纵切为相等的两半,检查皮质和髓质的厚度、色泽,交界部血管状态和组织结构纹理。最后检查肾盂,注意其容积,有无积尿、积脓、结石等,以及黏膜的性状。
(9)胃。先观察其大小,浆膜面的色泽,有无粘连,胃壁有无破裂和穿孔等,然后由贲门沿大弯剪至幽门。胃剪开后,检查胃内容物的数量、性状、含水量、气味、色泽、成分,有无寄生虫等。最后检查胃黏膜的色泽,注意有无水肿、充血、溃疡、肥厚等病变。
(11)**。公猪检查睾丸和附睾,检查其外形、大小、质地和色泽,观察切面有无充血、出血、瘢痕、结节、化脓和坏死等。母猪检查子宫、卵巢和输卵管,先注意卵巢的外形、大小,卵黄的数量、色泽,有无充血、出血、坏死等病变。
6.尸体剖检记录的编写。剖检记录必须包括主诉、发病经过、主要症状及体征、临床诊断、治疗经过、各种化验室检查结果、死亡前的表现及临床死亡原因等。剖检记录必须遵守系统、客观、准确的原则,对病变的形态、大小、重量、位置、色彩、硬度、性质、切面的结构变化等都要客观地描述和说明,应尽可能避免采用诊断术语或名词来代替。有的病变用文字难以表达时,可绘图补充说明,有的可以拍照或将整个器官保存下来。
7.病料的采取。
(1)采取病料的基本原则。
①采集最适病料。理想的病料,应是无菌采取的含病原微生物量高的血液、器官组织或分泌物和排泄物。因此要根据疾病的病性采取合适的病料,如无法估计是何种疾病时,应根据临床症状和病理变化采集病料或全面采取病料。取材时应注意病原微生物感染所致疾病的类型(如呼吸道疾病、胃肠道疾病、皮肤和黏膜性疾病、败血性疾病等)、病原微生物的侵入部位、病原微生物感染的靶器官等。细菌检验病料应当是采自未经抗菌药物治疗的患病动物,并且应多做几张涂片。
②适时采集。采集病料的时间一般在疾病流行早期、典型病急性期,此时病原微生物的检出率高。后期由于体内免疫力的产生,病原微生物减少,检测病原微生物比较困难,同时可能出现交叉感染,增加判断的困难性。在采集供抗体测定用的血清时,可适时地采集急性期和恢复期的两份血清样品,一般两份血清的间隔时间为14~2ld。内脏病料的采取,须于动物死后立即进行;夏季最迟不超过4~6h,冬天不超过24h,否则时间过长,由肠内侵入其他细菌,致使尸体腐败,有碍于病原菌的检出。供做切片的样品采取后必须立即投入固定液,否则时间过长,会使细菌和组织细胞死亡、溶解,影响检验结果。有条件做现场培养时,剖开尸体后应进行接种培养,然后采样,最后剖检。
③无菌操作。采集病料所用的器械及容器要进行严格的消毒:刀、剪、镊子等金属用具可煮沸消毒30min,使用前最好用酒精擦拭,并在火焰上烧一下;器皿(玻制、陶制等)在高压灭菌器或干烤箱内灭菌;软木塞和橡皮塞应高压灭菌;载玻片用2%~5%碳酸钠煮沸消毒5~10min,煮沸后用清水冲洗干净,拭干保存或浸泡于95%酒精中以备使用;注射器和针头放于清洁水中煮沸30min即可,或用一次性注射器。病料采取过程都应该无菌操作,尽量避免杂菌污染。采取一种病料,使用一套器械,或器械经酒精擦拭或火焰灭菌后再采取另一种病料;一种病料放入一种容器,不可混放。
(2)病料采集的方法。
①**材料。一般用灭菌棉拭子采取破溃的脓汁、鼻液、**分泌物与排泄物。未破的脓肿、胸水、腹水在皮肤表面消毒后,用无菌注射器抽取。
②血液。无菌采取血液,供病原培养、抗体检测和血液检查之用。体型较大的单蹄和偶蹄类动物少量血样可以从耳背静脉采血;毛皮动物少量采血可通过耳壳外侧静脉采取;鼠类可以通过尾尖、耳背静脉、眼窝内血管采血;兔可从耳背静脉、颈静脉、心脏等处采血;鸟类可以从肘关节内侧的翅静脉、跖部内静脉或心脏采血。
③乳汁。**先用消毒药水洗净(取乳者的手也应事先消毒),并把**附近的毛刷湿,最初所挤的3~4股乳汁弃去,然后再采集10ml左右乳汁于灭菌试管中。若仅供显微镜直接染色检查,则可于其中加入0。5%的甲醛溶液。
④淋巴结及内脏组织。应在尸体解剖后立即采取。将淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏及肾脏等有病变的部位各采取1~2立方cm的小方块,分别置于灭菌容器中,并尽可能采取有病变及病变交界处的部位。
⑤胃肠及内容物。可将胃肠两端扎好剪下,然后送往实验室。或用烧红的器具烧烙表面后穿一小孔,用灭菌棉拭子取其内容物,放入无菌的器皿内或放入装有生理盐水或PBS的试管内。
⑥脑、脊髓。按病理解剖方法取出脑、脊髓。取一部分放入10%甲醛溶液的瓶中,供组织学检查;一部分放入50%甘油生理盐水瓶中,供微生物学检查。或者将头部取下,用塑料口袋包好直接送检。
⑦胆汁。先用烧红刀片或铁片烧烙胆囊表面,再用灭菌细管或注射器刺入胆囊内吸取胆汁,置于灭菌试管中。
⑧皮肤。取大小约10×10平方cm的皮肤一块,保存于30%甘油缓冲溶液中,或10%饱和盐水溶液中,或10%甲醛溶液中。
⑨骨头。需要完整的骨头时,应将附着的肌肉和韧带等全部除去,表面撒上食盐,然后包于浸过5%石炭酸水或0。1%升汞液的纱布或麻布中,装于木箱内送到实验室。
⑩流产胎儿及小动物尸体。将流产胎儿及小动物尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中,装于木箱内送到实验室。
8.病料的送检。供细菌检验用的病料,要防止腐败,必须及时送检。一般可用有冰块的保温瓶或其他低温条件,以使病料不腐败。最好由专人送检,并带好送检的有关病情、病例、剖检等记录,以供检验人员的参考。为避免散播病原,盛有病料的容器,瓶口要盖紧,用胶布封好或石蜡封固,并用消毒液充分擦拭容器的表面。瓶上加贴标签,注明样品来源、种类、保存方法、采集时间等。为避免病料外漏,应立放于金属筒内,填塞防震填充料(木屑、纸渣、稻草、塑料泡沫等)。
实训四消毒与免疫接种技术
一、目的要求掌握消毒器械与敷料、畜舍、地面土壤、粪便与污水的消毒方法;熟悉生物制剂的保存、运送和用前检查方法,掌握免疫接种的方法和步骤。
二、材料与器械甲醛溶液、高锰酸钾、水、脸盆、各种疫苗、注射器、刺种针、消毒器械等。
三、实验内容各种消毒技术及器械认识,各种免疫接种的方法技术,常用生物制剂的保存、运送和用前检查方法。
四、方法与步骤
消毒技术:
消毒是以消毒药物借某些消毒器械或直接消灭被传染源散播在目的物(器械、用具等)及环境(舍内、运动场、粪便及污水等)的病原体或由传染媒介带来的病原体,以切断传染途径,防止疫病发生蔓延。消毒是保证畜禽生产安全,健康和正常的必不可少的重要措施,对防制任何疾病都有利。
1.消毒的器械
(1)高压消毒锅。又叫高压蒸气灭菌器。是利用水的沸点随着压强的升高而提高的原理,将水装在密闭器内加热,不断产生的水蒸气,使密闭器内压力增加,温度随之上升,在103。4kPa(1。05kg平方厘米)蒸汽压下,温度达到121。3℃,维持15~20min,可把所有的微生物杀死。高压消毒锅的种类很多,但在构造的原理和使用的性质上都大致相同。所不同的只是在形式上的大小、外观的形状、附件的多少和使用的繁简程度。它大致分为手提式、直立式和横卧式三类,而以手提式为最常用。
(2)电热煮沸器。煮锅的热源用电能。煮沸消毒15min,可把目的物中的细菌繁殖体都杀死。大部分芽孢和真菌孢子也能杀死。其消毒方法简单、方便,消毒的效果可靠,故应用广泛。
(3)手动喷雾器。分手压式和背携式两种,主要用于小面积的消毒。
(4)机动喷雾器。利用马达为动力,分担架式和背携式两种。在大的畜禽场里用于大面积消毒。
(5)火焰喷灯。利用汽油或煤油或酒精作燃料的一种喷灯,其喷出的火焰温度很高,可达500℃以上,适于消毒不能燃烧的污染物品。特别对寄生虫病和肠道传染病的消毒效果更佳。但在消毒时不要喷烧过久,以免将消毒物品烧坏,并且在消毒时应有一定的次序,以免发生遗漏。
2.常用消毒技术
(1)畜舍的消毒。畜舍的清毒按其时间进行,可分为经常性、定期性和突击性的消毒。经常性为每日或每周的清洁消毒,定期性为每月或畜舍空出后的大清洁消毒,突击性是当发生疫病时的临时应急的大消毒。
畜舍的消毒分两个步骤进行,第一步先作机械清扫、铲刮、洗刷、冲洗、通风等方法,以清除沾染于墙壁、地面、用具、设备等上的污物及尘埃,可减少舍内的病原60%~80%,是一种最经济而很有效的方法;第二步用化学消毒液向舍内空间喷雾或熏蒸,可达到消尘、灭菌的双重目的,能使舍内的病原体减少95%左右。